ООО Биометаллика представляет научный отчет по токсикологическим исслевованиям препарата "ФерроКвин"

 


Общество с ограниченной ответственностью
«БИОМЕТАЛЛИКА»

УДК 619:615.3
ВКГ ОКП 93 1640
Инв. N
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор
ООО «Биометаллика»
к. ветеринарных наук, доцент,
_______________________
«__» __________2004 А.Н.Трошин

ОТЧЕТ
О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ
Лабораторное исследование, изготовление и апробирование нового лекарственного средства «Ферро-Квин» для профилактики и лечения железодефицитной анемии.

ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА «ФЕРРО-КВИН» И ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
(промежуточный)






Краснодар 2004
СПИСОК ИСПОЛНИТЕЛЕЙ

Руководитель работы,
ответственный исполнитель

к. вет. наук, доцент,
________________ «__» __________2004 А.Н.Трошин

(реферат, введение,
физические и химические
свойства, заключение).


Соисполнители:

Руководитель группы
к. биол. наук
ст. научн. сотрудник ___________ «__» ______2004 Т.И.Ермакова (экспериментальная
часть, Всероссийский
ветеринарный научно-
исследовательский
институт патологии
фармакологии и терапии).




Нормоконтролер ________________ «__» __________2004 Т.И.Трошина.


РЕФЕРАТ
Отчет 20 с., 1 кн., 10 табл., 17 источников.
ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, «ФЕРРО-КВИН», ЖЕЛЕЗО, ДЕФИЦИТ, АНЕМИЯ, ЛАБОРАТОРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ, ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ
Объектом исследования являются физико-химические свойства лекарственного средства для профилактики и лечения железодефицитной анемии ферро-квин и определение его фармакологическая активность на лабораторных животных.
Цель работы — изучить основные физические и химические параметры лекарственного средства, определить его токсичность на лабораторных животных при энтеральном и парентеральном введении.
В процессе работы проводились экспериментальные исследования плотности препарата, определялись pH, наличие ионов железа, содержание суммарного железа в препарате, устойчивость при хранении, а так же острая токсичность на лабораторных животных.
В результате исследования установлено соответствие основных параметров лекарственного средства требованиям, предъявляемым к парентеральным препаратам железа.
Основные конструктивные и технико-эксплуатационные показатели: содержание железа в лекарственном средстве 7,4 – 7,6 %, класс опасности IV, при парентеральном введении не вызывает патологического воспаления.
Степень внедрения — изготовлен опытный образец для доклинических испытаний препарата.
Эффективность ферро-квина определяется его низкой себестоимостью и высоким содержанием действующего вещества в препарате.
Синтезированное железосодержащее вещество может применяться для целей производства биологически активных добавок и лекарственных средств.





СОДЕРЖАНИЕ

Введение 6
1. Острая токсичность препарата ферро-квин, раствора для инъекций 8
2. Острая токсичность ферро-квина для перорального применения 15
3. Изучение физико-химических свойств ферро-квина 16
3.1. Определение рН 16
3.2. Наличие ионов железа 17
3.3. Содержание суммарного железа в препарате 17
3.4. Содержание фенола 17
3.5. Устойчивость при хранении 18
3.6. Плотность препарата ферро-квин 18
Заключение 19
Список использованных источников 20















ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ

ч. - часть
1 н. - нормальный
х.ч. - химически чистый
кг - килограмм
г - грамм
ГФ - государственная фармакопея РФ
мес. - месяц
мг - миллиграмм
мл - миллилитр
млрд. - миллиард
л - литр
Ed. - издание
ЕD50 - эффективная доза для 50% животных в опыте
Eur.Ph. - европейская фармакопея
LD50 - летальная доза для 50% животных в опыте
LD100 - минимальная доза изучаемого вещества, которая вызывает учитываемый эффект у всей группы животных (100% гибель)
ЖДА - железодефицитная анемия
WHO - всемирная организация здравоохранения
pat. - патент
et. all - и другие (соавторы)








ВВЕДЕНИЕ
По всему миру железодефицитной анемией страдают 1,8 млрд. человек, а дефицит железа определяют у 3,6 млрд. человек в мире, т.е. почти у 30% населения планеты. В некоторых группах риска, в частности у детей 5–14 лет, его частота достигает тревожной отметки 82% (1). Железо в профилактических целях необходимо вводить каждому новорожденному поросенку (2,3).
Рынок железосодержащих препаратов для парентерального применения в России и за рубежом представлен большим количеством наименований лекарств. Содержание железа в них составляет от 20 до 200 мг/мл. (4)
В ветеринарной медицине основным действующим веществом в данных средствах является комплексное соединение железа с декстраном (5). Таким образом, несмотря на значительный товарный и ценовой ассортимент инъекционных форм железа в ветеринарии фактически применяется один препарат с различными (по желанию изготовителя названиями).
Учитывая высокую стоимость декстрана и необходимость закупки его за рубежом была установлена необходимость разработки нового железосодержащего препарата.
Синтез лекарственного средства осуществлен в 2004 году. В окончательной версии утверждено наименование «Ферро-Квин». Препарат представляет собой жидкость красно-коричневого цвета, со слабым специфическим запахом и вкусом.
Доклинические исследования проведены на кафедре фармакологии и токсикологии Кубанского государственного аграрного университета с привлечением соисполнителей для установления соответствия препарата существующим нормативным требованиям (5).
Изучения свойств препарата «Ферро-Квин» в 2004-2005 гг осуществляется при поддержке «Фонда содействия малым формам предприятий в научно-технической сфере» в рамках НИР по «Лабораторному исследованию, изготовлению и апробированию нового лекарственного средства «Ферро-Квин» для профилактики и лечения железодефицитной анемии».
Учитывая полученные результаты лекарственное средство «Ферро-Квин» может быть востребовано для профилактики и лечения железодефицитной анемии в медицине и ветеринарии. Возможно так же использование данного препарата в качестве источника железа для производства биологически активных добавок, а так же лекарственных форм для приема внутрь и инъекций.
Научная и практическая актуальность исследования новых железосодержащих препаратов обуславливается экономическими факторами и недостаточной терапевтической эффективностью железосодержащих препаратов, а так же рядом возможных побочных явлений при применении железодекстранов, а именно: 1) канцерогенностью железодекстранов (6), 2) сенсибилизацией организма, возникновением анафилактического шока и летальным исходом а тек же комплексом негативных проявлений общего характера – лихорадка, головные боли, артралгией, рвотой (7), 3) применение железодекстрана не рекомендуется детям до 4 мес. возраста (7), следует отметить, что поросятам железадекстран вводится на 1-й и 14-й день после рождения. В опыте (8) установлено, что парентеральное введение железадекстрана привело к гибели 17% поросят.
Оценка эффективности и безопасности лекарственного средства осуществляется в соответствии с положением о порядке экспертизы, испытания и регистрации ветеринарных препаратов в Российской Федерации (9).
Целью данного этапа являются:
1. предварительная фармако-токсикологическая оценка ферро-квина.
2. изготовление лекарственного средства ферро-квин и изучение его физико-химических свойств.
Задачи этапа:
1. определение острой токсичности препарата ферро-квин, раствора для инъекций,
2. острая токсичность препарата для перорального применения,
3. установление pH, наличия ионов железа, содержания суммарного железа в препарате, содержания фенола, определение плотности, и прогнозное определение стабильности при хранении изготовленного препарата.




1. Острая токсичность препарата ферро-квин, раствора для инъекций
Проведено изучение параметров острой токсичности препарата ферро-квин для инъекций. Опыты были поставлены на беспородных крысах-самцах массой 180,0-200,0 г и беспородных белых мышах-самцах массой 18,0-20,0 г. Животные были подобраны и распределены по группам по принципу парных аналогов, содержались в идентичных условиях кормления и содержания. Вследствие рекомендации препарата ферро-квин, для подкожного, внутримышечного, внутривенного применения дана токсикометрическая оценка препарата для каждого пути введения препарата.
Перед началом исследований животных выдерживали на карантине в течение 12 дней, а перед введением препарата подвергали суточной депривации. В каждой серии опытов было сформировано 6 групп животных по 6 особей в группе.
В первой серии опытов острая токсичность ферро-квина испытана при пероральном способе введения. Препарат вводили однократно внутрь в дозах 5; 10; 15; 20; 25; 30 мл /кг массы тела. Препарат вводили в объеме 0,6 мл на мышь и 6,0 мл на крысу (дозы являются предельно допустимыми по объему для перорального введения) внутрижелудочно специальным металлическим зондом. Объем, вводимого животным ферро-квина доводили стерильным изотонических раствором натрия хлорида (0,89%). Гибели животных при всех дозах за весь период наблюдения за животными на протяжении 14 дней не наблюдалось. Данные полученные в ходе опыта на лабораторных животных представлены в таблицах 1-2.
Таблица 1
Острая токсичность ферро-квина для белых мышей при пероральном введении.

Доза
препарата, мл/кг массы тела
Доза препарата на 1 животное (m=20,0), мл
Кол-во
мышей

Из них
пало
Клиника
интоксикации
5 0,1 6 0 Отсутствует
10 0,2 6 0 Отсутствует
15 0,3 6 0 Первичная клиника интоксикации
20 0,4 6 0 Умеренная степень интоксикации
25 0,5 6 0 Умеренная степень интоксикации
30 0,6 6 0 Выраженная клиника интоксикации
При введении препарата в дозах 0,1-0,2 мл (мышам) и 1,0-4,0 мл (крысам) не обнаружено какого-либо токсического действия. С увеличением дозы для мышей до 0,3 мл, для крыс до 5 мл на животное при внутреннем применении в течение 3-4 часов отмечались первичные клинические признаки интоксикации, гибели животных не наблюдалось в течение всего периода наблюдения.
Таблица 2
Острая токсичность ферро-квина для белых крыс
при пероральном введении

Доза
препарата,
мл/кг
массы тела


Доза препарата на 1 животное (m=200,0), мл
Кол-во
крыс


Из них
пало


Клиника
интоксикации


5 1 6 0 Отсутствует
10 2 6 0 Отсутствует
15 3 6 0 Отсутствует
20 4 6 0 Отсутствует
25 5 6 0 Первичная клиника интоксикации
30 6 6 0 Умеренная степень интоксикации

При оральном введении ферро-квина наблюдали характерную картину интоксикации. Так, в дозах 25 мл/кг для крыс и 15 мл/кг для мышей первичное клиническое проявление токсического действия ферро-квина проявлялось единичными тетаническими судорогами слабой степени, угнетением, снижением двигательной активности. Умеренная степень интоксикации, проявляемая соответственно для крыс в дозе 30 мл/кг массы тела и для мышей в дозе 20 мл/кг массы тела характеризовалась мышечным тетанусом, который через 40-60 мин сменялся общим угнетением. Выраженная клиника интоксикации наблюдалась у мышей в дозе 30 мл/кг. Множественные спастические сокращения мышц, непрекращающийся тетанус в течение 2-3 часов, спазм желудка, напряжение брюшной стенки, в дальнейшем угнетение. Общее угнетение и снижение двигательной активности у животных в ответ на введение препарата сохранялось в течение 72 часов после приема препарата.
Во второй серии опытов проведено изучение острой токсичности препарата ферро-квин при внутримышечном и подкожном введении. Установлено, что однократная инъекция препарата в максимально допустимых дозах (таб. 3-6) не вызывает гибели животных, клиническая картина отравления слабо выражена.
Таблица 3
Острая токсичность для белых мышей при подкожном введении.
Доза
препарата,
мл/кг
массы тела Доза препарата на 1 животное (m=20,0), мл Кол-во
мышей

Из них
пало

Клиника
интоксикации


10 0,2 6 0 Отсутствует
15 0,3 6 0 Отсутствует
20 0,4 6 0 Отсутствует
25 0,5 6 0 Отсутствует
30 0,6 6 0 Первичная клиника интоксикации
35 0,7 6 0 Первичная клиника интоксикации

Таблица 4
Острая токсичность для белых крыс при подкожном введении.

Доза
препарата,
мл/кг
массы тела


Доза препарата на 1 животное (m=200,0), мл
Кол-во
крыс


Из них
пало


Клиника
интоксикации


10 2 6 0 Отсутствует
15 3
6 0 Отсутствует
20 4 6 0 Отсутствует
25 5 6 0 Отсутствует
30 6 6 0 Отсутствует
35 7 6 0 Отсутствует

Как при подкожных, так и при внутримышечных инъекциях доза препарата вводилась дробно в несколько мест. В двух случаях подкожных инъекций ферро-квина в дозе 25 мл/кг у белых крыс на месте введения образовывался асептический абсцесс.


Таблица 5
Острая токсичность ферро-квина для белых мышей
при внутримышечном введении


Доза
препарата,
мл/кг
массы тела


Доза препарата на 1 животное (m=20,0), мл
Кол-во
мышей


Из них
пало


Клиника
интоксикации


2,5 0,05 6 0 Отсутствует
5 0,1 6 0 Отсутствует
10 0,2 6 0 Отсутствует
15 0,3 6 0 Отсутствует
20 0,4 6 0 Первичная клиника интоксикации
25 0,5 6 0 Первичная клиника интоксикации


Таблица 6
Острая токсичность ферро-квина для белых крыс
при внутримышечном введении

Доза
препарата,
мл/кг
массы тела


Доза препарата на 1 животное (m=200,0), мл
Кол-во
крыс


Из них
пало


Клиника
интоксикации


2,5 0,5 6 0 Отсутствует
5 1 6 0 Отсутствует
10 2 6 0 Отсутствует
15 3 6 0 Отсутствует
20 4 6 0 Отсутствует
25 5 6 0 Отсутствует

Таким образом, при подкожном, внутримышечном и пероральном применении препарата определить среднесмертельную дозу не представляется возможным, так как в максимально вводимых дозах препарат не вызывает летального эффекта.
Патоморфологическое изучение по окончании эксперимента не выявило нарушений в структурной организации внутренних органов. Препарат по степени токсичности относится к IV классу опасности – малоопасные вещества (ГОСТ 12.1.007-76).
В третьей серии токсикометрической оценки ферро-квина препарат вводили внутрибрюшинно в объеме для белых мышей – 1,0 мл, для белых крыс – 6,0 мл. Дозу препарата доводили до нужного объема стерильным изотоническим раствором натрия хлорида. Было сформировано 10 групп крыс и 10 групп белых мышей подобранных по принципу парных аналогов. За животными опытных и контрольных групп проводили ежедневное клиническое наблюдение в течение 14 дней. Особое внимание уделяли развитию признаков токсикоза, оценивали их тяжесть, продолжительность, время выздоровления или гибели животных. Данные представлены в таблицах 7-8.
Среднелетальную дозу - LD50 - определяли аналитическим способом по методу Кербера (1931), величины LD16 и LD84 находили графически на основании пробитов и доз в мл/кг массы тела животных, показатель ошибки средней дозы эффекта - SLD50 - аналитически и графически.
На основании результатов первичных токсикометрических исследований были получены данные для исчисления величины LD50.
Полученные данные позволили определить параметры острой токсичности при однократном внутрибрюшинном введении. Расчет LD50 ферроквина провели биометрически по формуле:
LD50= LD100-∑(ZD)/M, где
LD100- минимальная доза изучаемого вещества, которая вызывает учитываемый эффект у всей группы животных (100% гибель);
LD50 – доза вещества, которая вызывает гибель 50% животных в группе (среднесмертельная доза);
D – интервал между двумя дозами,
Z – среднее арифметическое из числа животных у которых наблюдалась учитываемая реакция под влиянием двух смежных доз;
M – число животных в каждой группе

Таблица 7
Острая токсичность ферро-квина для белых крыс
Белые крысы
Показатель Доза, мл/кг
13,0 14,0 15,0 16,0 17,0 18,0 19,0 20,0 21,0 22,0
Количество животных
в группе, гол 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6
Выжило, гол 6 5 5 4 3 3 2 2 1 0
Погибло, гол 0 1 1 2 3 3 4 4 5 6
% гибели 0,00 16,67 16,67 33,33 50,00 50,00 66,66 66,66 83,33 100,0
Z 0,5 1 1,5 2,5 3 3,5 4 4,5 5,5
d 1 1 1 1 1 1 1 1 1
dz 0,5 1 1,5 2,5 3 3,5 4 4,5 5,5
∑dz=26

LD50для крыс=22,0-26/6=17,67 мл/кг




Таблица 8
Острая токсичность ферро-квина для белых мышей
Белые мыши
Показатель Доза, мл/кг
12,0 13,0 14,0 15,0 16,0 17,0 18,0 19,0 20,0
Количество животных в группе, гол 6 6 6 6 6 6 6 6 6
Выжило, гол 6 5 3 3 3 2 1 1 0
Погибло, гол 0 1 3 3 3 4 5 5 6
% гибели 0,00 16,67 50,0 50,0 50,00 66,66 83,33 83,33 100,00
Z 0,5 2 3 3 3,5 4,5 5 5,5
d 1 1 1 1 1 1 1 1
dz 0,5 2 3 3 3,5 4,5 5 5,5
∑dz=27

LD50 для мышей=20,0-25/6=15,5 мл/кг
Полученные данные позволили определить параметры острой токсичности ферро-квина. Так для белых мышей МПД ферроквина составляет 12,0 мл/кг , LD16 -13,2 мл/кг, LD50 -15,5 мл/кг, LD84 – 18,6 мл/кг, LD100 -20,0 мл/кг. Для белых крыс МПД ферро-квина составляет 13,0 мл/кг, LD16 – 14,5 мл/кг, LD50 -17,67 мл/кг, LD84 – 20,7 мл/кг, LD100 -22,0 мл/кг. Клинические признаки острого отравления ферроквином у лабораторных животных при внутрибрюшинном введении препарата сходны с предыдущими опытами. Патолого-анатомическая картина вскрытия павших животных показала гиперемию тонкого и толстого отдела кишечника, мелкие одиночные кровоизлияния на брыжейке. Смерть наступала в результате остановки сердца. Желудочки сердца и предсердия наполнены несвернувшейся кровью, в грудной стенке – геморрагический экссудат.
Учитывая результаты изучения острой токсичности и результаты определения МПД ферроквина для препарата установлена тест-доза на безвредность –0,10 мл (внутрибрюшинно) на мышь с массой тела 18-20 грамм.


2. Острая токсичность ферро-квина для перорального применения
Проведено изучение параметров острой токсичности препарата ферро-квин, предназначенного для перорального применения. Опыты были поставлены на беспородных крысах-самцах массой 185,0-208,0 г и беспородных белых мышах-самцах массой 17,8-21,0 г. Животные были подобраны и распределены по группам по принципу парных аналогов, содержались в идентичных условиях кормления и содержания. Перед началом исследований животных выдерживали на карантине в течение 12 дней, а перед введением препарата подвергали суточной депривации. Было сформировано 6 групп животных по 6 особей в группе.
Препарат вводили однократно внутрь в дозах 5; 10; 15; 20; 25; 30 мл /кг массы тела. Препарат вводили в объеме 0,6 мл на мышь и 6,0 мл на крысу (дозы являются предельно допустимыми по объему для перорального введения) внутрижелудочно специальным металлическим зондом. Объем, вводимого животным ферро-квина доводили стерильным изотонических раствором натрия хлорида (0,89%). Гибели животных при всех дозах за весь период наблюдения за животными на протяжении 14 дней не наблюдалось. Данные полученные в ходе опыта на лабораторных животных представлены в таблицах 9-10. При введении препарата в дозах 0,1-0,3 мл (мышам) и 1,0-5,0 мл (крысам) не обнаружено какого-либо токсического действия. С увеличением дозы для мышей до 0,4 мл, для крыс до 6 мл на животное при внутреннем применении в течение 3-4 часов отмечались первичные клинические признаки интоксикации, гибели животных не наблюдалось в течение всего периода наблюдения.
Таблица 9
Острая токсичность ферро-квина для белых мышей при пероральном введении
Доза препарата, мл/кг массы тела Доза препарата на 1 животное (m=20,0), мл Кол-во
мышей Из них
пало Клиника
интоксикации
5 0,1 6 0 Отсутствует
10 0,2 6 0 Отсутствует
15 0,3 6 0 Отсутствует
20 0,4 6 0 Умеренная степень интоксикации
25 0,5 6 0 Умеренная степень интоксикации
30 0,6 6 0 Умеренная степень интоксикации

Таблица 10
Острая токсичность ферро-квина для белых крыс
при пероральном введении

Доза
препарата,
мл/кг
массы тела


Доза препарата на 1 животное (m=200,0), мл
Кол-во
крыс


Из них
пало


Клиника
интоксикации


5 1 6 0 Отсутствует
10 2 6 0 Отсутствует
15 3 6 0 Отсутствует
20 4 6 0 Отсутствует
25 5 6 0 Отсутствует
30 6 6 0 Первичная клиника интоксикации

При оральном введении ферро-квина для перорального введения наблюдали характерную картину интоксикации, идентичную препарату ферро-квин для инъекций. Согласно данным клинического обследования препарат ферроквин для внутреннего применения обладает менее выраженной токсичностью. Так, клиника острого отравления ферро-квином наблюдалась у крыс только в дозе 6 мл на животное, у мышей в дозах более 0,4 мл/животное.
Патоморфологическое изучение по окончании эксперимента не выявило нарушений в структурной организации внутренних органов.
Согласно полученным данным, препарат ферро-квин для орального применения по степени токсичности относится к IV классу опасности – малоопасные вещества (ГОСТ 12.1.007-76).

3. Изучение физико-химических свойств лекарственного средства ферро-квин
Изучение физико-химических свойств лекарственного средства ферро-квин проводилось на пятнадцати опытных сериях, изготовленных в условиях исследовательской лаборатории ООО «Биометаллика» в период с 01.09.04 по 01 12.04. Перед проведением испытаний все образцы хранились в условиях архива для изготовленных лекарственных средств в течении одной недели.
3.1. Определение рН
Определение рН проводили колориметрически согласно ст. ГФ XI «Определение рН» стр. 115. Сначала определили приблизительную величину рН при помощи индикатора (бромтимолового синего) ст. ГФ XI стр. 137, она составила 6,0 – 7,6 (11)
После приближенного определения рН испытуемого раствора изготовили шесть буферных растворов, пригодных для данной области рН и отличающихся друг от друга на 0,2. В одну пробирку наливали 10 мл испытуемого раствора, в остальные шесть – буферные растворы. Во все пробирки добавили по 2 – 3 капли раствора индикатора. Сравнивали окраску испытуемого раствора с окрасками буферных растворов.
По результатам исследования серий №1-5 препарата рН 7,3 – 7,4.
3.2. Наличие ионов железа
Наличие свободных ионов железа в препарате является причиной разрушения тканей организма в месте введения препарата (12).
Для определения свободных ионов железа приготовили тестовый раствор. Он содержит железо в количестве 50 мг/мл.
1 мл тестового раствора смешали с 4 мл воды и с 1 мл 2н раствора аммиака. Образования преципитата гидроокиси железа в растворе не установлено во всех пятнадцати образцах препарата (модифицированный метод Bp 2001, Iron Dextran Injection (10 per cent).
Это свидетельствует об отсутствии ионизированного железа в препарате.
3.3. Содержание суммарного железа в препарате
Содержание суммарного железа в препарате установлено по методу изложенному в фармакопее Великобритании Bp 2001, Iron Dextran Injection (10 per cent) (12).
Содержание суммарного железа в ферро-квине составило 76,4 + 3,6 мг/мл.
3.4. Содержание фенола
Содержание фенола в фармацевтических препаратах регламентируется нормами фармакопеи и не должно превышать 5 мг/мл.
Содержание фенола в ферро-квине определяли по методу ГФ X стр. 983 (10).
Содержание фенола в ферро-квине составило 4,6 + 0,2 мг/мл.

3.5. Устойчивость при хранении
Устойчивость при хранении определяли путем серии последовательных замораживаний препарата до – 18 °С и оттаивания при комнатной температуре. Установлено, что замораживание препарата не оказывает влияния на его физико-химические свойства. Не установлено различий в фармакологическом действии препарата после его размораживания.
Устойчивость при хранении при повышенных температурах определялась в течении 1 месяца при хранении в термостате при температуре 70 °С. Установлено, что замораживание препарата не изменяет физико-химических свойств ферро-квина. Образцы препарата заложены для хранения в течении 12 месяцев в условиях архива препаратов.
3.6. Плотность препарата ферро-квин.
Плотность препарата ферро-квин определяли с помощью ареометра по методу изложенному в ГФ XI стр. 24 (11).
Плотность препарата ферро-квин составила 1,10 – 1,12 г/см3 .
















ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Железосодержащий препарат ферро-квин. Сформулированы его основные технические и фармакологические параметры:
- доступность исходных компонентов;
- сравнительная простота и надежность технологического процесса;
- содержание действующего вещества по Fe3+ не менее 50 – 100 мг/мл;
- отсутствие раздражающего действия в месте введения (особенно актуально для инъекционного способа);
- лекарственное средство должно быть достаточно жидким (для изготовления лечебных сиропов и инъекций);
- срок хранения не менее 1 года в интервале температур от – 18С до + 100С (с учетом климатических условий и возможности стерилизации);
- низкая токсичность - LD50 более 500 мг(Fe3+)/кг массы животного, отсутствие свободных ионов железа.
Синтез лекарственного средства осуществлен в 2004 году. В окончательной версии утверждено наименование «Ферро-Квин». Препарат представляет собой жидкость красно-коричневого цвета, со слабым специфическим запахом и вкусом.
Доклинические исследования проведены на кафедре фармакологии и токсикологии Кубанского государственного аграрного университета. Установлено соответствие препарата основным параметрам, указанным выше.
Изучена острая токсичность ферро-квина при парентеральном способе введения - LD50 для крыс=17,67 мл/кг, LD50 для мышей=15,5 мл/кг, что составляет соответственно LD50 для крыс=1325 мг Fe3+/кг, LD50 для мышей=1162 мг Fe3+/кг.
Препарат ферро-квин для парентерального и орального применения по степени токсичности относится к IV классу опасности – малоопасные вещества.
Изученные физико-химические показатели препарата соответствуют требованиям, предъявляемым к парентеральным лекарственным формам железа (13-17).
С учетом экономической и социальной значимости разработки, данные полученные на первом этапе проекта позволяют сделать заключение о целесообразности дальнейшего изучения физико-химических свойств ферро-квина и его фармакологической активности на лабораторных и продуктивных животных.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. WHO (1998). The World Health Report 1998: Life in the 21st Century, a vision for all.
2. Venn A.J. et. аll, 1947, Iron metabolism in piglet anemia, J. Com. Path. 57, p. 314;
3. Карелин А.И. Анемия поросят. - Москва: Россельхозиздат, 1983.
4. Compendium of veterinary products, Fifth edition, North Am. Comp., MI, USA, 1999.
5. Iron Dextran Injection 10 per cent US pat. 2 820 741, 1958, Binger.
6. Seventh Annual Report on Carcinogenesis PB95-109781, 1994 p. 236
7. Iron Dextran INFUFER® Sabex, CPS Compendium of Pharmaceuticals and Specialties, Canadian Pharmacists Association Ottawa, 34th Ed., Login Brothers, Ontario, Canada 1999
8. E.B. Kegley et. all, Nut. Res. №22, 2002, p. 1211.
9. положение о порядке экспертизы, испытания и регистрации ветеринарных препаратов в Российской Федерации. Ветеринарное законодательство. Т. 1. Под редакцией В.М.Авилова. 2000; Росзооветснабпром. 551 с.
10. Государственная фармакопея СССР, X издание, 1968, Медицина, Москва. 1079 с.
11. Государственная фармакопея СССР, XI издание, т.1, 1987, Медицина, Москва. 334 с.
12. British Pharmacopoeia 2001, w. Eur.Ph. 2001
13. Ветеринария 2003 - № 4 стр. 34, Карпуть И.М., Николадзе М.Г. Диагностика и профилактика алиментарной анемии поросят.
14. Baby pig anemia, Evelyn R. Miller, Duane E. Ullrey, Michigan State University, Department of Veterinary Science, Penn State, Aug. 26, 1999.
15. FDA of USA, dept. of health and human serv., part 522-Sec. 522.1182, Iron dextran complex injection. 1996.
16. Iron Requirement of 5 to 10 Kilogram Pigs, Brian K. Anderson, MS. and Robert A. Easter, Ph.D., PorkNet, The Online Resource for the Pork Industry,2003.
17. Iron Toxicity In Newborn Pigs: http://www.merckmanual.com, 2003.